游戏操作遥感/十字键：移动C遥感：转动视角L键：切换小刀R键：举枪/配合B补充弹药/配合A键射击Z键：打开地图Y键：开启道具栏画面X键：操作道具移动/控制ASHLEY移动或原地待命B键：跑动/取消/配合R键补充弹药START：开启设定菜单
游戏新增道具黄色药草游戏中一开始LEON的体力值不是最大值，经不了敌人的几下攻击，因此若有过硬的体力才能生存下来，黄色药草就起到增加体力最大值的作用，注意单独的黄色药草是不能服用的，必需将绿，红，黄三色药草组合在一起服用才会增加体力最大值，3色合一之后不但能增加体力最大值，还能补满体力，因此留着待体力少时服用才起到其最大价值，游戏中拥有不少的黄色药草，3色合一后卖给商人还能卖10000大样。
鸡蛋，鱼游戏前期村庄中的母鸡会生蛋，蛋的效果和绿药草一样具有回复效果。蛋一共有3种，褐鸡蛋，白鸡蛋和金鸡蛋，回复效果也不相同，金鸡蛋的获得需要看RP，取得方法是攻击小蛇后随机出现。而在水中的鱼也是具有回复效果的，越大回复效果越多，这2类回复道具只在游戏前期出现，尤其是鱼的数量及少。
手榴弹本作武器没有硫弹枪，故手榴弹充当了其作用。手榴弹分三种：绿色手榴弹，红色燃烧弹和蓝色闪光弹。手榴弹的攻击威力大而且范围广，适合用于BOSS战和大批敌人聚集一起时使用。燃烧弹相当以前的火焰弹，同样在BOSS战和大批敌人前好用，只是要注意自己太靠近也会受到伤害。闪光弹属于辅助武器，适合在逃跑的情况下使用，投掷闪光弹可以使周围的敌人暂时失明失去进攻及防御能力。（此时攻击他们就会恢复） 闪光弹最有用的地方就是对寄生虫有一击必杀的效果。
金钱本作最重要的道具，正所谓金钱不是万能的，但是没有金钱是万万不能的。可以用于购买武器，回复道具或者提升武器能力。而游戏中获得途径主要有3种：最普通的方法就是打死敌人后会掉。而场景中的木箱和木桶也会随机掉落。第3种就是卖武器弹药及道具。金钱的掉落数量有100-10W不等。各场景捡到的道具就是专门用来卖钱的，数量种类可谓多种多样，有些甚至可以组合起来，这样卖价也大大的提高了。
武器商人游戏中将多处遇到这JS，这时候的金钱也有了用武之地，从商人处可以购买各种武器（弹药除外），回复道具，强化武器和变卖种种道具。这里若将之前搜刮到的各种宝贝组合起来卖给商人还能卖个好价钱。另外商人也是能攻击的，若杀死了他这个区域里就不会出来了。
游戏系统变化战斗本次变化最多的就是战斗了，当举枪后会在LEON面前出现一道红外线，当敌人出现在红外线上时会出现一红点，这时就可以攻击到敌人了，攻击敌人的不同部位敌人会做出不同的反应，损伤也不相同，不同的敌人的弱点也不相同，掌握敌人弱点和精湛的准度能使得战斗简单不少。游戏中的敌人种类很多前期村庄中的敌人有使用斧头，叉子，匕首，炸弹等。中期城堡中的异教徒使用铁锤，镰刀，弩等武器，有的甚至利用盾牌做掩护。后期的军事基地里的敌人有使用电棒和枪械的。前期的敌人弱点在于头部，而当剧情到了夜晚后敌人若被暴头会生长出一种寄生虫，攻击力特别的高，被碰2下就死了，攻击范围又打，对付他们用阻击攻击头部一枪就死，另外它们害怕光线，所以使用闪光弹能秒杀。
道具箱本作取消了异次元空间箱，换来的是10×6共60格道具栏，游戏中可以花钱升级不断升级，最高共有120格。当道具较多时，合理放置物品就成为了关键。按L键或者R键可以切换道具的方向。不要的道具可以仍掉，仍掉的道具将从此消失，不会再出现了，所以不需要的道具最好是卖给商人。本作中的剧情道具和金银珠宝都是放在键.宝一栏的，所以不需要担心道具栏不够。
地图游戏中的地图与以前大不相同，按Z键打开地图菜单后按A键可查看详细地图，R键放大地图、L键缩小地图，方向键可以上下左右移动地图。地图上的绿条表示：可以通过的门，红条表示：无法通行的门，蓝条表示：用现身上钥匙能打开的门，另外地图中的大红点表示目的地。若从商人处购买地图的话就会显示打字机，商人，Mission和宝藏。组合键就是所谓的QTE系统，在游戏中起到很大的作用，在敌人受到攻击后出现挣扎时靠近就会出现KICK的提示，按动A键可以踢飞敌人，也是节约弹药的一种手段。而在特殊情况时，根据提示按可以化险为夷，这点在BOSS战时得到充分的体现，显得尤其重要。记录游戏的记录依然是使用打字机，但是却不需要色带了，无疑说明了游戏的难度是系列里最高的。CONTINUE死忘之后不必读取最后一次记录，而是从之前一点点继续挑战。
保护ASHLEY游戏中当ASHLEY与LEON一同行动时要注意保护好她，普通情况下ASHLEY受不了敌人2下攻击。当LEON举枪攻击敌人时ASHLEY若在面前则会蹲下来，若不辛被敌人抱起要立即将敌人击倒，否则被带走将直接GAMEOVER的，但要注意别打中ASHLEY，可是一击必杀的。游戏中有几处地方需要双人合作才能完成，类似于BIO0的双人合作系统。
刀本作刀的作用得到了提升，它可以用来破坏木箱和木桶，敌人受到攻击会有反应，因此刀在对付单个人时十分厉害，而且刀又不占道具栏格子，按L键就能切换出来使用，非常的方便。
BIO4流程攻略第1章1-11：进入屋子发生剧情消灭敌人。2：一路前行过桥后来到村庄。3：在村庄里消灭掉一定数量的敌人后发生剧情。 4：从时钟塔那条路来到另一个区域，再往右上离开。5：前进一会会遭到滚石攻击，这是要快速按A逃跑，注意跑一段时间后会要按L+R或A+B躲避（按哪个组合是随机的）6：进入最大的屋子里救出被关在衣柜里的人，发生剧情进入1-2。要点：途中救下白狼，之后的BOSS战会来帮忙。村子里有一种蓝色的小牌子，一共有15快，只要打碎10块就能从武器商那获得一把手枪。有的敌人会仍手雷，如果击中手雷会直接引暴。1-21：剧情过后出去，寻找2块石板打开大门离开。2：通过工房爬上水井来到一扇有机关的大门，转动图案使其与门上图象一样就能打开房门。3：在房间内找到钥匙后前往村庄里的教堂。要点：这里会首次遇到商人，可以购买武器或道具和改造武器。2块石板分别在左面屋顶处和右面山道尽头。（这里敌人很多，不需恋战，几处的油筒可以利用。）注意一下路上的捕兽器，下水道的鱼可以补充体力。1-31：来到教堂却发现未能进入，之后从左面小路通过一处水路来到小港口。2：港口坐船时会发生BOSS战。要点：教堂外有一处坟墓，调查3处石碑会发现3个图象，之后在教堂旁的机关转动转盘点亮这3个图案能得一宝石。BOSS战：对付水怪时要注意控制船，水怪带着你前进时需要躲避水上的木桩，一不小心被装上掉入水中就要快速按A逃回船上，否则就会成为水怪的食物。HP越少游的就越慢，这点要注意。水怪的攻击方式有2种，一种是游动一段时间后会潜入水中在窜出来，这时要注意水怪潜入时是向着哪边，那么它就会从另一边窜出来。第2种攻击方式就是当船停止移动时，它就会从远处重过来，这时需要对准它的嘴巴攻击（它从哪边窜过来有提示，在一定距离攻击后还能做第2次攻击）这场战打的是耐心，不要贪多，不然很容易被它打入水中。第2章2-11：开动控制水闸进入瀑布后的山洞得到ROUND INSIGNI。2：从山洞原路返回教堂途中发生BOSS战。3：进入教堂利用顶上的吊灯做跳台来到另一边，利用机器打开牢门。4：进入牢房救出ASHLEY，出去发生剧情。要点：从现在开始若暴了村名的头的话，那寄生虫就会窜出，此怪攻击距离长，威力大（2下解决LEON）攻击悬挂木箱的铁链使木箱落入水中形成道路才能去开动控制开关。回到大教堂时此处的敌人变成了狗，要小心。教堂机关的破解方法是转动红，蓝，绿3个转盘使得3个转盘合在一起呈现出当中的图案。具体转动方法是红2次，绿3次，蓝1次。BOSS战：巨人的攻击方式很多，不过破绽也较打，比较容易躲避。一开始它只会用拳头和脚攻击，只要远离它就没问题了，若之前救下白狼的话，战斗不多久就会来帮忙，这时会吸引住巨人，我们要做的就是攻击它，当巨人受到一定程度的伤害后就会跪下体内的寄生虫就会从背部窜出，这时要跳到它的背部砍寄生虫能给予它最大的伤害。以后每当受到一定程度伤害后会跪下，反复砍其背部的寄生虫就行，几次后解决。战斗中巨人会拔起地上的树攻击，只要按L+R回避既可，对付它的冲撞也是如此闪避若它仍石块只要往2边跑就行。2-21：通过独木桥与LUIS并肩作战。要点：这里开始ASHLEY会跟在LEON的后面，要小心敌人抓走她。教堂外的炸药车可以利用。BOSS战：对付的是海量的村人。首先将1楼3个窗户都用书柜堵住，然后守在楼梯口战斗，不要节约弹药，LUIS会不时给你弹药，战斗一段时间LUIS会叫你上2楼对付敌人，这是要特别留意敌人从2楼爬上来，要及时将窗户口的梯子放下，敌人被暴头的怪物很恐怖，别被包围了，守护一段时间后就过关了。2-31：到房屋外转动机关打开左右大门。2：乘坐吊车来到尽头的房屋进行BOSS战。3：利用BOSS掉下的眼珠打开大门进入城堡。要点：转动木栅栏机关时左边或右边是随玩家自由选择的，不过遇到的敌人却不同。左边的敌人是村名，数量众多，其中包括2名电锯狂。右边的敌人是巨人，不过这里拥有很多弹药哦。在坐吊车前